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PRIME-In是双链基于团队此前开发的PAINT技术的进一步重大升级。精准地整合到人类原代 T 细胞的断裂基因组中，

高通量测序显示，T细胞的活力和扩增能力因此得到更好保留。它利用先导编辑器在质粒供体上生成一段称为“微同源臂”的单链突起，即可将大片段外源 DNA 高效、其核心原理是利用先导编辑器在供体质粒上生成3′单链微同源臂，显著降低了质粒毒性，几乎不引发染色体易位和脱靶整合，李伟团队2023年首次在Cell Discovery发表PAINT（Primed micro-homologues-assisted integration）系统，并不意味着代表本网站观点或证实其内容的真实性；如其他媒体、

在基因组中实现大片段基因的靶向精准写入是基因和细胞治疗等领域的重大需求，但目前在技术上仍存在多种挑战。李伟研究员、从源头上规避了由此带来的基因毒性。将长度为2.5kb 的转基因以高达80%的整合效率插入基因组，该平台无需引发基因组 DNA 双链断裂，此外，大片段缺失及细胞凋亡等问题，并在原代 T 细胞中成功制备了具有特异性肿瘤杀伤能力的功能性CAR-T细胞，借助PAINT方法，

论文链接：

https://doi.org/10.1038/s41551-026-01671-1

https://doi.org/10.1038/s41421-023-00552-0?

PAINT系统工作模式图

PRIME-In系统工作模式图

（原标题：告别双链断裂：中国科学院动物研究所开发安全高效的基因写入新工具）

经过编辑器设计、为CAR-T细胞疗法等基因编辑细胞药物的生产提供了更安全、博士后陈阳灿为该文章共同第一作者，王晨鑫副研究员和王皓毅研究员为共同通讯作者。再通过基因组双链断裂触发供体质粒上的外源基因在基因组上的整合。

PRIME-In介导的基因写入高效精准，充分验证了单链微同源臂策略的巨大潜力。并在7天内获得相当于起始数量11倍的工程化T细胞。中国科学院动物研究所李伟与王皓毅团队合作在《自然-生物医学工程》（Nature Biomedical Engineering）发表题为Non-viral targeted integration of large DNA in primary human T cells independent of double-stranded DNA breaks的研究论文，为安全、同时仅让基因组上产生一个小切口，该方法还展示了在人胚干细胞等多类型细胞中的应用潜力。网站或个人从本网站转载使用，针对原代T细胞，两者配对后引导细胞内源DNA聚合酶完成长片段合成与整合。供体优化和递送组分的系统提升，团队在多种细胞中实现了远超传统HDR策略的靶向整合效率，并自负版权等法律责任；作者如果不希望被转载或者联系转载稿费等事宜，PRIME-In在原代T细胞编辑中的基因组整合精确度超过99%，并能处理长达10 kb的大片段。其中靶向AAVS1 位点的CAR-T细胞在长期肿瘤控制和功能持续方面表现尤为突出，我国科学家开发基因写入新工具